0item(s)

Sie haben keine Artikel im Warenkorb.

Product was successfully added to your shopping cart.
Thomas Reinard

Molekularbiologische Methoden 2.0

Verfügbarkeit: Auf Lager

Lieferzeit: 2-3 Tage

EAN/ISBN
9783838587424
2. 2018

Details

Von den Grundlagen der Laborarbeit über aktuelle Methoden und Verfahren bis zum Fortgeschrittenenwissen

Die Molekularbiologie hat sich in den letzten Jahren rasant weiterentwickelt. Vor wenigen Jahren noch völlig unbekannte Technologien und Verfahren, wie die Modulare Klonierung, PCR-basierte Klonierungen oder das Gibson Assembly gelten heute als Standard.
Dies ist das bislang einzige Methodenbuch, das die neuen, inzwischen weit verbreiteten Verfahren, wie Gibson Assembly, Golden Gate, MoClo und Genom Editierung, beschreibt.
Diese und viele andere zukunftsweisenden Verfahren wurden aussagekräftig illustriert, zahlreiche Wissensboxen, Tipps und Protokolle machen den Titel zum perfekten Praxisbegleiter. Ideal für Bachelor- und Master-Studierende und für Berufspraktiker!
  • CoverU1
  • Titel3
  • Impressum4
  • Inhalt5
  • Vorwort zur 1. Auflage12
  • Vorwort zur 2. Auflage13
  • 1 Das Leben und seine Bestandteile15
  • 1.1 Der Aufbau von DNAund RNA17
  • 1.2 Der genetische Code20
  • 1.3 Die Gene22
  • 1.4 Proteine26
  • 1.5 Die Zelle30
  • 2 Grundlagen der Arbeit im Labor33
  • 2.1 Wasser34
  • 2.2 Messung des pH-Werts35
  • 2.3 Puffer36
  • 2.4 Waagen36
  • 2.5 Mikropipetten38
  • 2.6 Gefäße im Labor40
  • 2.7 Zentrifugen41
  • 2.8 Mischen und Konzentrieren44
  • 2.9 Probenlagerung46
  • 2.10 Steriles Arbeiten46
  • 2.11 Geräte für den Aufschluss von Geweben49
  • 2.12 Pflege und Aufzucht von Escherichia coli51
  • 3 Aufreinigung von Nukleinsäuren57
  • 3.1 Gegenspieler erfolgreicher DNA- und RNA-Isolationen59
  • 3.2 Extraktion von Nukleinsäuren62
  • 3.3 Die weitere Aufreinigung der DNA64
  • 3.4 Silica Matrices69
  • 3.5 Ausgewählte DNA Aufreinigungsverfahren71
  • 3.6 Die Isolation von RNA76
  • 3.7 Tipps zum Erzielenhoher Ausbeuten bei der Isolation von Nukleinsäuren78
  • 3.8 Quantifizierung von Nukleinsäuren79
  • 4 Polymerase-Kettenreaktion83
  • 4.1 Prinzip der Polymerase-Kettenreaktion85
  • 4.2 Die Komponenten der PCR86
  • 4.3 Geräte für die PCR93
  • 4.4 Die Standard-PCR94
  • 4.5 Ausgewählte PCR-Methoden94
  • 4.6 Anwendungen der PCR105
  • 4.7 Optimierung der PCR-Reaktion105
  • 5 Klonieren für Einsteiger107
  • 5.1 Restriktionsenzyme109
  • 5.2 Ligation116
  • 5.3 (De)Phosphorylierung von DNA118
  • 5.4 Enzyme für spezielle Aufgaben121
  • 5.5 Die Transformationvon E. coli121
  • 5.6 Der Weg zum klonierten Gen123
  • 5.7 Der ungerichtete Einbau einer amplifizierten DNA in einen Vektor123
  • 5.8 Der gerichtete Einbau von DNA in einen Vektor127
  • 5.9 Wenn es mal nicht klappt ...129
  • 6 Vektoren131
  • 6.1 Plasmide132
  • 6.2 Klonierungsplasmide135
  • 6.3 Expressionsplasmide139
  • 6.4 Reportergene142
  • 6.5 Phagen146
  • 6.6 Phagemide147
  • 6.7 Shuttle-Vektoren147
  • 6.8 Künstliche Chromosome: YACs, BACs und PACs148
  • 6.9 Hefen als Klonierungs- und Expressionssystem149
  • 6.10 Pflanzen als Bioreaktoren152
  • 6.11 Die Transformation von Säugetieren und tierischen Zellkulturen156
  • 7 Elektrophoreseund Hybridisierungvon Nukleinsäuren161
  • 7.1 Agarose-Gelelektrophorese von DNA162
  • 7.2 Die Detektion der DNA im Gel167
  • 7.3 Präparative Agarosegele169
  • 7.4 Auftrennen von RNA im Agarosegel170
  • 7.5 Fehlersuche bei Agarose-Gelelektrophorese170
  • 7.6 Hybridisierung vonNukleinsäuren171
  • 7.7 Microarrays174
  • 8 Fortgeschrittene Klonierung177
  • 8.1 Klonsammlungen und synthetische Gene179
  • 8.2 Rekombinase-basierte Klonierung181
  • 8.3 Mutageneseverfahren183
  • 8.4 PCR-basierte Klonierungsverfahren: RF-Cloning und oePCR186
  • 8.5 Synthetische Biologie188
  • 8.6 Biobricks189
  • 8.7 Nahtlose Klonierungsverfahren189
  • 8.8 Gibson Assembly195
  • 8.9 Vergleich der Verfahren198
  • 9 Proteinaufreinigung201
  • 9.1 Homogenisation203
  • 9.2 Extraktion von Proteinen207
  • 9.3 Dialyse und Konzentrierung211
  • 9.4 Weitere Aufreinigungsschritte212
  • 9.5 Quantifizierung von Proteinen217
  • 9.6 Aufreinigungsverfahren für getaggte Proteineaus E. coli221
  • 10 Gelelektrophoresevon Proteinen227
  • 10.1 Die Polyacrylamid-Gelelektrophorese (PAGE)229
  • 10.2 Die denaturierende SDS-PAGE229
  • 10.3 Das Färben der Gele237
  • 10.4 Weitere Elektrophoreseverfahren für Proteine239
  • 10.5 Western Blotting241
  • 10.6 Massenspektrometrische Verfahren246
  • 11 Immunbiochemische Methoden249
  • 11.1 Antikörper251
  • 11.2 Prinzipien immunbiochemischer Verfahren254
  • 11.3 ELISA261
  • 11.4 Immunfärbung nach Western Blot266
  • 11.5 Immunaffinitätschromatographie269
  • 11.6 Weitere Antikörper270
  • 12 Fortgeschrittene Verfahren277
  • 12.1 DNA-Sequenzierung278
  • 12.2 Next Generation Sequenzierung281
  • 12.3 Von den „Omics“ zur Systembiologie285
  • 12.4 Analyse der Genfunktion286
  • 12.5 Genom Editierung289
  • 13 Bioinformatik295
  • 13.1 Datenbanken296
  • 13.2 Dateiformate298
  • 13.3 Sequenzsuche anhand von Stichwörtern (Entrez)300
  • 13.4 Sequenzsuche mit einer Sequenz (BLAST)300
  • 13.5 Bioinformatik zur Planungder Laborarbeit305
  • 14 Anhang307
  • A1 Sicherheit im Labor308
  • A2 Die 10 goldenen Laborregeln309
  • A3 Das Laborbuch und die finale Arbeit311
  • Verzeichnis der „Gut zu wissen“-Boxen313
  • Abbildungsverzeichnis314
  • Verzeichnis der Maps316
  • Verzeichnis der Protokolle316
  • Tabellenverzeichnis317
  • Abkürzungsverzeichnis318
  • Sachverzeichnis321
  • Quellenverzeichnis328